MRP7 Plasmide Double Nickase (h): sc-406412-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MRP7 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MRP7 Double Nickase Plasmid (h) e il MRP7 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ABCC10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MRP7 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406412-NIC | 20 µg | $410.00 |
ABCC10 codifica il trasportatore umano della famiglia ATP-binding cassette MRP7 (ABCC10), una pompa di efflusso della membrana plasmatica che utilizza l’idrolisi dell’ATP per esportare un’ampia gamma di xenobiotici e metaboliti endogeni. L’attività di MRP7 contribuisce alla detossificazione cellulare e influenza la distribuzione intracellulare dei farmaci, intersecandosi con vie che regolano il trasporto di membrana, la gestione dei lipidi e le risposte cellulari allo stress. Un’espressione o una funzione deregolata di ABCC10/MRP7 è stata associata, in modelli tumorali, a fenotipi di chemioresistenza alterati e a variazioni di parametri farmacocinetici, rendendolo rilevante per studi sulla biologia dei trasportatori e sulle interazioni farmaco–trasportatore. In quanto membro della sottofamiglia ABCC, MRP7 costituisce anche un sistema maneggevole per analizzare come i trasportatori ABC contribuiscano alle funzioni di barriera e alla distribuzione tessuto-specifica di piccole molecole.
MRP7 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ABCC10 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ABCC10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ABCC10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ABCC10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.