MDH2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402825

개요

MDH2는 미토콘드리아 말산 탈수소효소 2(mitochondrial malate dehydrogenase 2)를 암호화하며, TCA(삼카복실산) 회로에서 말산을 옥살로아세트산으로 가역적으로 전환하는 핵심적인 NAD⁺ 의존성 효소입니다. 미토콘드리아 NADH 생성과 옥살로아세트산의 가용성을 조절함으로써, MDH2는 산화적 대사, 애너플레로시스(anaplerosis), 레독스 균형을 조율하고 미토콘드리아 호흡과 연계된 생합성 플럭스를 지원합니다. MDH2 기능은 대사 재프로그래밍, 활성산소종(ROS) 처리, 그리고 영양 결핍 또는 저산소 스트레스에서 세포 적합성을 좌우하는 미토콘드리아 품질 관리 경로와 밀접하게 연결되어 있습니다. MDH2 활성 또는 발현의 변화는 신경대사 불균형과 종양 관련 대사 의존성 등, 미토콘드리아 기능 장애와 연관된 질병 관련 표현형에 관여하는 것으로 보고되어 왔습니다.

MDH2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MDH2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MDH2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MDH2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MDH2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MDH2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MDH2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MDH2 기능에 중요한 MDH2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MDH2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MDH2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 MDH2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MDH2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MDH2 HDR 플라스미드 (h) 및 MDH2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MDH2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MDH2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.