Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MDH2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402825
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MDH2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MDH2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MDH2 Anticorpo (1G12): sc-293474
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MDH2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402825 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MDH2 codifica a malato desidrogenase mitocondrial 2, uma enzima-chave dependente de NAD⁺ que catalisa a conversão reversível de malato em oxaloacetato no ciclo do ácido tricarboxílico (TCA). Ao controlar a produção mitocondrial de NADH e a disponibilidade de oxaloacetato, a MDH2 ajuda a coordenar o metabolismo oxidativo, a anaplerose e o equilíbrio redox, além de sustentar fluxos biossintéticos acoplados à respiração mitocondrial. A função da MDH2 está intimamente ligada à reprogramação metabólica, ao manejo de espécies reativas de oxigênio e a vias de controlo da qualidade mitocondrial que moldam a aptidão celular sob stress nutricional ou hipóxico. Alterações na atividade ou na expressão de MDH2 têm sido implicadas em fenótipos relevantes para doenças associados à disfunção mitocondrial, incluindo desequilíbrio neurometabólico e dependências metabólicas associadas a tumores.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MDH2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MDH2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MDH2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MDH2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MDH2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MDH2 para a investigação da sinalização de MDH2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MDH2 críticos para a função MDH2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MDH2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MDH2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MDH2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MDH2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MDH2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MDH2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MDH2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MDH2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.