MCT9 Plasmide Double Nickase (h): sc-409073-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MCT9 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MCT9 Double Nickase Plasmid (h) e il MCT9 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC16A9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MCT9 Plasmide Double Nickase (h) | sc-409073-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MCT9 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409073-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC16A9 codifica il trasportatore di monocarbossilati 9 (MCT9), un membro della famiglia SLC16 implicato nel flusso transmembrana di piccoli acidi organici e metaboliti correlati che influenzano l’equilibrio energetico cellulare. Modulando la disponibilità di metaboliti intra- ed extracellulari, MCT9 può intersecarsi con vie che governano l’omeostasi metabolica e la segnalazione accoppiata al trasporto. Variazioni genetiche ed espressione deregolata di SLC16A9 sono state associate ad alterazioni nella gestione dell’urato e a fenotipi metabolici più ampi, a sostegno della sua rilevanza negli studi sulla biologia del trasporto renale e sulla regolazione sistemica dei metaboliti. In quanto nodo legato al trasporto nelle reti metaboliche, MCT9 viene spesso esaminato in contesti quali il nutrient sensing, l’equilibrio redox e l’accoppiamento trasportatore–enzima.
MCT9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC16A9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC16A9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC16A9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC16A9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.