Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) ILK: sc-400864-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ILK consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ILK (h) y el plásmido de doble nickasa ILK (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ILK. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ILK Anticuerpo (65.1): sc-20019
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ILK | sc-400864-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ILK | sc-400864-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La quinasa ligada a integrinas (ILK) es una seudocinasa de serina/treonina asociada a las adhesiones focales que actúa como andamiaje, conectando las β‑integrinas con el citoesqueleto de actina y coordinando la mecanotransducción. ILK participa en la señalización integrina/FAK y modula las vías PI3K–AKT, GSK3β/β‑catenina y las GTPasas de la familia Rho para regular la adhesión celular, la migración, la supervivencia y programas epitelio‑mesénquima. A través de sus interacciones con PINCH y parvin, ILK favorece el ensamblaje de las adhesiones focales y la remodelación del citoesqueleto, influyendo en la detección de la matriz extracelular y la arquitectura tisular. La desregulación de la señalización de ILK se ha asociado con invasión alterada, remodelación relacionada con fibrosis y otras patologías en las que se encuentran perturbadas la señalización dependiente de adhesión y las respuestas al estrés.
ILK El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ILK en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ILK. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ILK. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ILK alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.