IL-21R Plasmide Double Nickase (h): sc-404225-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-21R Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IL-21R Double Nickase Plasmid (h) e il IL-21R Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IL21R. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-21R Antibody (H-11): sc-137120
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-21R Plasmide Double Nickase (h) | sc-404225-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-21R Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404225-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL21R umano codifica IL-21R, un recettore di citochine di tipo I che si associa alla catena γ comune (IL2RG) per mediare la segnalazione di IL-21 nelle cellule linfoidi. Il legame con il ligando attiva JAK1/JAK3 e i programmi a valle di STAT3/STAT1/STAT5, modulando la differenziazione delle cellule B, la dinamica dei centri germinativi, lo switch di classe degli anticorpi e le funzioni effettrici di cellule T e NK. La segnalazione tramite IL-21R interagisce anche con le vie PI3K–AKT e MAPK per coordinare proliferazione, sopravvivenza e rimodellamento trascrizionale durante l’attivazione immunitaria. Un’attività deregolata di IL21R è stata implicata nell’infiammazione immunomediata, nella suscettibilità alle infezioni e in alterazioni dello sviluppo linfocitario, rendendolo un nodo rilevante per studi di immunologia meccanicistica.
IL-21R Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IL21R nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IL21R. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IL21R. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IL21R interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.