HDC Plasmide Double Nickase (h): sc-403606-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HDC Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HDC Double Nickase Plasmid (h) e il HDC Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HDC. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HDC Plasmide Double Nickase (h) | sc-403606-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HDC Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403606-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’istidina decarbossilasi (HDC) catalizza la conversione dell’L-istidina in istamina, una ammina bioattiva, in una reazione dipendente dal fosfato di piridossale. L’istamina regola l’infiammazione, la secrezione di acido gastrico, la neurotrasmissione e la permeabilità vascolare. Nei tessuti immunitari e di barriera, la produzione di istamina guidata da HDC modella le risposte effettrici di mastociti e basofili attraverso la segnalazione dei recettori dell’istamina e le vie a valle mediate da GPCR, che modulano il rilascio di citochine e il traffico leucocitario. L’attività di HDC è inoltre collegata a programmi metabolici e redox tramite il turnover delle ammine biogene e può influenzare la comunicazione cellula-cellula all’interno dei microambienti tissutali. Un’espressione deregolata di HDC o una biosintesi alterata dell’istamina sono state associate a infiammazione allergica, disturbi gastrointestinali e processi neuroinfiammatori, rendendo HDC un bersaglio utile per studi meccanicistici della segnalazione istaminergica.
HDC Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HDC nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HDC. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HDC. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HDC interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.