GDPD3 Plasmide Double Nickase (h): sc-405288-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GDPD3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GDPD3 Double Nickase Plasmid (h) e il GDPD3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GDPD3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GDPD3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405288-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GDPD3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405288-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GDPD3 (glycerophosphodiester phosphodiesterase domain containing 3) codifica una presunta glicerofosfodiestere fosfodiesterasi coinvolta nel metabolismo dei fosfolipidi e della glicerofosfocolina, collegando il rimodellamento dei lipidi di membrana agli output della segnalazione cellulare. Influenzando i livelli di lisofosfolipidi e di metaboliti correlati, GDPD3 è in grado di modulare vie legate alla dinamica di membrana, ai secondi messaggeri lipidici e all’adattamento metabolico. Programmi alterati del metabolismo lipidico sono frequentemente osservati in stati proliferativi e di risposta allo stress, rendendo GDPD3 un nodo utile per studiare la regolazione, guidata dai lipidi, di crescita, sopravvivenza e segnalazione associata all’infiammazione. La disregolazione del turnover dei fosfolipidi è stata associata a fenotipi di cancro e di malattie metaboliche, supportando l’analisi di GDPD3 in modelli cellulari rilevanti per la malattia.
GDPD3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GDPD3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GDPD3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GDPD3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GDPD3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.