GalNAc-T13 Plasmide Double Nickase (h): sc-407103-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GalNAc-T13 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GalNAc-T13 Double Nickase Plasmid (h) e il GalNAc-T13 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GALNT13. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GalNAc-T13 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407103-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **GALNT13** codifica la polipeptide N-acetilgalattosaminiltransferasi 13 (**GalNAc-T13**), un enzima residente nell’apparato di Golgi che avvia la **O-glicosilazione di tipo mucinico** trasferendo GalNAc sui residui di serina e treonina di proteine secrete e di membrana. Modellando i pattern di O-glicani, GalNAc-T13 influenza la stabilità proteica, l’elaborazione proteolitica e le interazioni ligando–recettore che incidono su adesione cellulare, migrazione e trasduzione del segnale attraverso vie dipendenti dalle glicoproteine. Un’alterata espressione di **GALNT13** e programmi di O-glicosilazione sono stati associati a fenotipi oncogenici, inclusi cambiamenti nell’invasività delle cellule tumorali e nelle interazioni con il microambiente extracellulare. Gli studi funzionali esaminano comunemente **GALNT13** nel contesto di reti più ampie di glicosilazione che modulano il riconoscimento immunitario e la biologia delle cellule epiteliali.
GalNAc-T13 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GALNT13 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GALNT13. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GALNT13. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GALNT13 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.