DISP2 Plasmide Double Nickase (m): sc-431923-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DISP2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DISP2 Double Nickase Plasmid (m) e il DISP2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Disp2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DISP2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-431923-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DISP2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-431923-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Disp2 codifica l’omologo murino di Dispatched 2 (DISP2), una proteina di membrana multipasso appartenente alla famiglia Dispatched, implicata nel traffico e nel rilascio extracellulare di ligandi Hedgehog modificati da lipidi. Influenzando la disponibilità dei ligandi, DISP2 può modulare la propagazione del segnale della via Hedgehog, che governa il patterning embrionale, la morfogenesi dei tessuti e il comportamento di cellule staminali/progenitrici. Sebbene DISP2 sia meno caratterizzato di DISP1, l’alterazione della segnalazione Hedgehog è ampiamente associata ad anomalie dello sviluppo e a programmi oncogenici, rendendo Disp2 un nodo rilevante per analizzare la regolazione della via. Lo studio di DISP2 può chiarire come i processi di trasporto di membrana plasmino i gradienti di morfogeni e le conseguenti risposte trascrizionali in vivo e in modelli cellulari.
DISP2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Disp2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Disp2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Disp2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Disp2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.