Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CRIK Plasmide Double Nickase (m): sc-419668-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CRIK Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CRIK Double Nickase Plasmid (m) e il CRIK Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Cit. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CRIK Antibody (E-6): sc-390437
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CRIK Plasmide Double Nickase (m) | sc-419668-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CRIK Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419668-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene Cit del topo codifica la citron Rho-interacting kinase (CRIK), una chinasi serina/treonina che agisce a valle di RhoA per coordinare il rimodellamento del citoscheletro di actina durante la citocinesi. CRIK si localizza al solco di clivaggio e al corpo intermedio (midbody), dove sostiene l’organizzazione dell’anello contrattile e l’abscissione tramite la regolazione della miosina e di altri effettori citoscheletrici. Questa attività collega Cit alla progressione del ciclo cellulare, alla fedeltà mitotica e all’omeostasi tissutale nei compartimenti proliferativi. La citocinesi deregolata e il controllo del citoscheletro associati a un’alterazione della funzione di CRIK sono rilevanti per studi su instabilità genomica, aneuploidia e fenotipi dello sviluppo in modelli murini.
CRIK Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Cit nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Cit. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Cit. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Cit interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.