Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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COMT Plasmide Double Nickase (h): sc-401823-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- COMT Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il COMT Double Nickase Plasmid (h) e il COMT Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira COMT. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: COMT Antibody (G-4): sc-137253
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
COMT Plasmide Double Nickase (h) | sc-401823-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
COMT Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401823-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La catecol-O-metiltransferasi (COMT) è una metiltransferasi citosolica e associata alla membrana che inattiva i substrati catecolici trasferendo un gruppo metile dalla S-adenosil-L-metionina alle catecolamine e agli estrogeni catecolici. Regolando il turnover di dopamina, noradrenalina e adrenalina, la COMT influenza l’omeostasi dei neurotrasmettitori e le risposte cellulari allo stress ossidativo e metabolico. L’attività della COMT si integra con le vie del metabolismo delle monoamine, insieme alla degradazione dipendente dalla MAO, e influisce sull’equilibrio redox attraverso il ciclo di ossidazione delle catecolamine. Le variazioni genetiche e di espressione della COMT sono state studiate in relazione a fenotipi neuropsichiatrici, sensibilità al dolore e biologia correlata agli ormoni, a supporto della sua rilevanza come bersaglio meccanicistico nella ricerca biomedica.
COMT Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus COMT nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di COMT. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di COMT. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con COMT interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.