CDK11 Plasmide Double Nickase (h): sc-405330-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CDK11 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CDK11 Double Nickase Plasmid (h) e il CDK11 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CDK19. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Cdk11 Antibody (8B6): sc-517026
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CDK11 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405330-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CDK11 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405330-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il CDK19 umano codifica una chinasi ciclina-dipendente che agisce all’interno del modulo chinasi del complesso Mediator per integrare i segnali con la trascrizione dipendente dall’RNA polimerasi II. Fosforilando regolatori trascrizionali e influenzando il rilascio della pausa in prossimità del promotore, CDK19 contribuisce al controllo di programmi di espressione genica legati alla progressione del ciclo cellulare, alle risposte allo stress e alla differenziazione. Un’attività o un’espressione alterate dei CDK associati a Mediator sono state collegate a un rimaneggiamento della trascrizione nel cancro e in altri disordini proliferativi, rendendo CDK19 un bersaglio rilevante per analizzare le reti di segnalazione oncogeniche e infiammatorie. Anche i membri della famiglia proteica CDK11 sono implicati in processi legati alla trascrizione e al ciclo cellulare, sottolineando la più ampia importanza del controllo trascrizionale regolato dai CDK nella biologia umana.
CDK11 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CDK19 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CDK19. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CDK19. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CDK19 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.