CD2BP2 Plasmide Double Nickase (m): sc-427646-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD2BP2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD2BP2 Double Nickase Plasmid (m) e il CD2BP2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Cd2bp2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD2BP2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-427646-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Cd2bp2** codifica **CD2BP2**, una proteina adattatrice coinvolta nello splicing del pre‑mRNA attraverso interazioni con componenti fondamentali dello spliceosoma e nella regolazione della scelta dei siti di splicing. CD2BP2 è stata associata all’organizzazione degli speckle nucleari e all’accoppiamento tra trascrizione e processamento dell’RNA, influenzando la diversità del proteoma tramite programmi di splicing alternativo. Attraverso queste vie di maturazione dell’RNA, Cd2bp2 può modulare transizioni dello stato cellulare come la differenziazione e le risposte allo stress, che dipendono da un equilibrio preciso delle isoforme trascrittiche. Uno splicing deregolato è una caratteristica comune nel cancro e nei disturbi del neurosviluppo e neurodegenerativi, rendendo Cd2bp2 un nodo utile per studi meccanicistici di fenotipi associati al processamento dell’RNA in modelli murini.
CD2BP2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Cd2bp2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Cd2bp2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Cd2bp2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Cd2bp2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.