CD26 Plasmide Double Nickase (h): sc-400862-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD26 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD26 Double Nickase Plasmid (h) e il CD26 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DPP4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD26 Antibody (202.36): sc-7633
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD26 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400862-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD26 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400862-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DPP4 codifica CD26, un’esopeptidasi serinica di superficie cellulare che rimuove dipeptidi N-terminali dai peptidi con prolina o alanina in posizione penultima, modulando così la biodisponibilità e l’estensione del segnale di chemochine, incretine e altri peptidi bioattivi. Oltre all’attività enzimatica, CD26 partecipa alla regolazione immunitaria tramite interazioni con l’adenosina deaminasi e con componenti della matrice extracellulare, influenzando l’attivazione, l’adesione e la migrazione dei linfociti T. CD26 si inserisce in vie che regolano il traffico infiammatorio, l’omeostasi del glucosio e la proteolisi extracellulare, e la sua espressione e attività sono associate a disturbi immunomediati, disfunzioni metaboliche e microambienti immunitari tumorali. La sua localizzazione di membrana e l’ampio repertorio di substrati rendono DPP4 un nodo utile per studiare la comunicazione intercellulare e la segnalazione regolata da proteasi.
CD26 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DPP4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DPP4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DPP4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DPP4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.