Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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CBX7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-424634
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CBX7 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico CBX7, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CBX7 Antibody (G-3): sc-376274
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CBX7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-424634 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Cbx7 codifica la proteina chromobox omologa 7 (CBX7), un “reader” di H3K27me3 contenente un cromodominio che funge da componente centrale del complesso repressivo Polycomb 1 (PRC1) per mantenere un silenziamento trascrizionale stabile. Nelle cellule murine, CBX7 contribuisce al controllo epigenetico dell’impegno di linea, della regolazione del ciclo cellulare e della senescenza, promuovendo la compattazione della cromatina e la repressione di loci dello sviluppo e di oncosoppressori. L’attività Polycomb dipendente da CBX7 si interseca con i programmi di differenziamento e con le reti di auto-rinnovamento delle cellule staminali, plasmando stati di espressione genica a lungo termine. La deregolazione della repressione mediata da Polycomb, inclusa un’alterata funzione di CBX7, è ampiamente studiata nell’oncogenesi, nei fenotipi associati all’invecchiamento e nei disturbi dello sviluppo come meccanismo di regolazione aberrante della cromatina.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CBX7 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Cbx7 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Cbx7 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Cbx7 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CBX7.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Cbx7 per lo studio della segnalazione di CBX7, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Cbx7 critici per la funzione di CBX7
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Cbx7 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal CBX7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal CBX7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Cbx7. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal CBX7 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR CBX7 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Cbx7 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Cbx7 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.