Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Btk Antibody (E-9): sc-28387. Fluorescent western blot analysis of Btk expression in K-562 (A), U-698-M (B), MEG-01 (C), BJAB (D) and NAMALWA (E) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgGλ BP-CFL 647: sc-516193.
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Btk双切口酶质粒(h): sc-400603-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Btk 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Btk双切酶质粒（h）和Btk双切酶质粒（h2）编码针对BTK的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Btk: sc-28387，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Btk双切口酶质粒(h) | sc-400603-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Btk双切口酶质粒(h2) | sc-400603-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
布鲁顿酪氨酸激酶（BTK；Btk）是一种非受体型 Tec 家族激酶，可在 B 细胞受体及多种免疫受体的下游传导信号，将激活输入与磷脂酶 Cγ2、钙离子通量、MAPK、PI3K–AKT 和 NF-κB 信号通路相耦联。在人类造血细胞中，BTK 有助于协调 B 细胞发育、抗原驱动的激活、细胞因子产生，以及髓系谱系中的先天免疫受体应答。BTK 信号的失调与免疫功能障碍有关，并在多种 B 细胞恶性肿瘤中促进致病性的存活与激活程序，因此 BTK 也成为研究淋巴细胞信号机制时广泛使用的关键节点。BTK 还与调控细胞黏附和迁移的通路相互作用，支持对免疫细胞转运及微环境相互作用的研究。
Btk 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 BTK 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对BTK内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏BTK的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了BTK基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。