Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BAALC Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405852
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BAALC Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico BAALC, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BAALC Antibody (H-12): sc-515606
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BAALC Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-405852 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
BAALC (brain and acute leukemia, cytoplasmic) codifica una proteina citoplasmatica arricchita in contesti ematopoietici e di neurosviluppo ed è implicata nella regolazione dello stato delle cellule progenitrici, includendo aspetti di proliferazione e differenziamento. Nelle linee mieloidi, l’espressione di BAALC è spesso utilizzata come correlato molecolare di programmi trascrizionali immaturi e di output di segnalazione alterati, intersecando vie che modellano la progressione del ciclo cellulare, la sopravvivenza e l’impegno di linea. Livelli deregolati di BAALC sono stati associati alle leucemie acute, dove viene studiato come parte di reti più ampie di espressione genica collegate alla leucemogenesi e all’eterogeneità di malattia. Queste caratteristiche rendono BAALC un nodo utile per dissezionare i meccanismi di mantenimento delle cellule staminali/progenitrici e della segnalazione ematopoietica aberrante in modelli cellulari umani.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO BAALC (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene BAALC in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del BAALC insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto BAALC a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina BAALC.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di BAALC per lo studio della segnalazione di BAALC, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni BAALC critici per la funzione di BAALC
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di BAALC per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal BAALC CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal BAALC CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus BAALC. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal BAALC Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR BAALC (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia BAALC per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio BAALC definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.