Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Plasmide Double Nickase (h): sc-400407-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Double Nickase Plasmid (h) e il Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ADCY3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400407-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400407-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’ADCY3 umano (adenilato ciclasi 3, AC3) è un’adenilil ciclasi associata alla membrana che catalizza la conversione dell’ATP in cAMP a valle della segnalazione mediata dai GPCR. Controllando i programmi di fosforilazione dipendenti da cAMP/PKA, ADCY3 influenza la segnalazione sensoriale, l’eccitabilità cellulare e le risposte trascrizionali mediate da CREB e da altri effettori sensibili al cAMP. L’attività di AC3 contribuisce a dinamiche compartimentalizzate del secondo messaggero che modellano processi metabolici e neuroendocrini, inclusa la regolazione ipotalamica dell’equilibrio energetico. Studi genetici e funzionali hanno collegato la disregolazione di ADCY3 o varianti del gene ad alterazioni dei fenotipi di segnalazione del cAMP e a caratteristiche rilevanti per la malattia, come l’obesità e la disfunzione metabolica correlata, supportandone l’impiego come nodo meccanicistico nella ricerca sulle vie GPCR–cAMP.
Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ADCY3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ADCY3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ADCY3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ADCY3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.