ADAMTS-18 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405932

Panoramica

ADAMTS18 codifica ADAMTS-18, una metalloproteasi secreta della famiglia ADAMTS che contribuisce all’organizzazione della matrice extracellulare attraverso la processazione proteolitica di substrati associati alla matrice. Regolando il turnover della matrice e le interazioni cellula–matrice, ADAMTS-18 influisce su processi di rimodellamento tissutale che si intersecano con vie di adesione, migrazione e segnalazione stromale. Alterazioni dell’espressione o della funzione di ADAMTS18 sono state riportate in studi di biologia dello sviluppo e in contesti patologici in cui l’integrità della matrice extracellulare e i segnali del microambiente risultano compromessi, a supporto della sua utilità come nodo meccanicistico in fenotipi incentrati sulla matrice.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ADAMTS-18 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ADAMTS18 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ADAMTS18 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ADAMTS18 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ADAMTS-18.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ADAMTS18 per lo studio della segnalazione di ADAMTS-18, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ADAMTS18 critici per la funzione di ADAMTS-18
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ADAMTS18 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ADAMTS-18 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ADAMTS-18 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ADAMTS18. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ADAMTS-18 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ADAMTS-18 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ADAMTS18 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ADAMTS18 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.