ADAMTS-18 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405932

Descripción general

ADAMTS18 codifica ADAMTS-18, una metaloproteasa secretada de la familia ADAMTS que contribuye a la organización de la matriz extracelular mediante el procesamiento proteolítico de sustratos asociados a la matriz. Al regular el recambio de la matriz y las interacciones célula–matriz, ADAMTS-18 influye en procesos de remodelación tisular que se solapan con vías de adhesión, migración y señalización del estroma. Se han descrito alteraciones en la expresión o la función de ADAMTS18 en estudios de biología del desarrollo y en contextos patológicos en los que se altera la integridad de la matriz extracelular y las señales del microambiente, lo que respalda su utilidad como nodo mecanístico en fenotipos centrados en la matriz.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ADAMTS-18 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ADAMTS18 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ADAMTS18 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ADAMTS18 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ADAMTS-18.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ADAMTS18 para la investigación de la señalización de ADAMTS-18, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ADAMTS18 críticos para la función de ADAMTS-18
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ADAMTS18 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ADAMTS-18 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ADAMTS-18 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ADAMTS18. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ADAMTS-18 (h) y el plásmido HDR ADAMTS-18 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ADAMTS18 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ADAMTS18 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.