ADAMTS-16 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406511

Panoramica

ADAMTS16 codifica ADAMTS-16, una metalloproteinasi secreta zinco-dipendente della famiglia ADAMTS che rimodella proteoliticamente i componenti della matrice extracellulare (ECM) e regola l’architettura tissutale. Modulando l’attività proteasica nello spazio pericellulare, ADAMTS-16 influenza il turnover dell’ECM, la segnalazione cellula–matrice e i segnali del microambiente che incidono sui programmi di adesione, migrazione e differenziamento. Alterazioni dell’espressione o dell’attività di ADAMTS16 sono state studiate in contesti in cui il rimodellamento della matrice è disregolato, inclusi la fisiologia cardiovascolare e renale, la biologia riproduttiva e il rimodellamento stromale associato ai tumori. In quanto proteasi associata alla matrice, ADAMTS-16 viene comunemente analizzata insieme a vie legate all’organizzazione dell’ECM, alla proteolisi e alla segnalazione cellulare all’interfaccia tissutale.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ADAMTS-16 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ADAMTS16 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ADAMTS16 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ADAMTS16 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ADAMTS-16.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ADAMTS16 per lo studio della segnalazione di ADAMTS-16, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ADAMTS16 critici per la funzione di ADAMTS-16
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ADAMTS16 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ADAMTS-16 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ADAMTS-16 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ADAMTS16. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ADAMTS-16 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ADAMTS-16 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ADAMTS16 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ADAMTS16 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.