ACE2 Plasmide Double Nickase (m): sc-427594-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ACE2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ACE2 Double Nickase Plasmid (m) e il ACE2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Ace2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ACE2 Antibody (E-11): sc-390851
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ACE2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-427594-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACE2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-427594-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene Ace2 del topo codifica l’enzima di conversione dell’angiotensina 2 (ACE2), una metallopeptidasi allo zinco che controbilancia il sistema renina–angiotensina convertendo l’angiotensina II in angiotensina-(1–7), modulando così la segnalazione vasoregolatoria, infiammatoria e fibrotica. L’attività di ACE2 modella le vie mediate dai GPCR a valle dei recettori dell’angiotensina e influenza l’omeostasi tissutale nei compartimenti cardiovascolare, renale e polmonare. Oltre al ruolo enzimatico, ACE2 partecipa alla biologia epiteliale ed endoteliale attraverso effetti sullo stress ossidativo e sui programmi citochinici. L’alterazione dell’espressione o della funzione di Ace2 è ampiamente utilizzata per indagare i meccanismi legati a ipertensione, rimodellamento cardiaco, danno polmonare acuto e infiammazione metabolica in modelli murini.
ACE2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Ace2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Ace2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Ace2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Ace2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.