κ-casein CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406821

개요

CSN3는 κ-카제인을 암호화하는 유전자로, κ-카제인은 분비형 인산화 단백질이며 전통적으로 우유 카제인 미셀의 구성 성분으로 알려져 있습니다. 이 단백질은 단백질의 용해도와 인산칼슘 조직화에 기여합니다. 세포외 당단백질로서 κ-카제인은 단백질–단백질 상호작용과 분비 동역학에 영향을 미치는 번역 후 변형을 겪기 때문에, 분비 경로에서의 가공 및 단백질분해 절단을 연구하기 위한 대표적인 모델 기질로 활용됩니다. CSN3의 생물학적 특성은 주로 수유 관련 맥락에서 가장 잘 규명되어 있지만, κ-카제인의 서열 및 당화의 변이는 단백질 안정성 변화와 생리활성 펩타이드 생성의 변화와 연관되어 있어, 세포외 단백질 처리와 신호전달의 기전 연구에도 의미가 있습니다. 인간 시스템에서 CSN3는 분비 단백질 발현 조절과, 단백질분해로 유래한 펩타이드가 세포 반응에 미치는 하위 효과를 분석하기에 다루기 쉬운 좌위로 활용됩니다.

κ-casein CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CSN3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CSN3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CSN3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 κ-casein 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 κ-casein 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CSN3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• κ-casein 기능에 중요한 CSN3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CSN3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• κ-casein CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 κ-casein CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CSN3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  κ-casein HDR 플라스미드 (h) 및 κ-casein HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CSN3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CSN3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.