Zscan4c Plasmide Double Nickase (m): sc-434121-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZSCAN4C Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZSCAN4C Double Nickase Plasmid (m) e il ZSCAN4C Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Zscan4c. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Zscan4c Plasmide Double Nickase (m) | sc-434121-NIC | 20 µg | $410.00 |
Zscan4c (zinc finger e proteina contenente il dominio SCAN 4C) è un fattore di trascrizione del topo prevalentemente associato allo stato “two-cell–like” nelle prime fasi dell’embriogenesi e a sottopopolazioni di cellule staminali pluripotenti. È implicato in programmi di stabilità del genoma, inclusi la regolazione della lunghezza dei telomeri, la riparazione del DNA e il rimodellamento della cromatina, ed è stato collegato all’attivazione di reti trascrizionali tipiche dello stadio di clivaggio. L’attività della famiglia Zscan4 è comunemente studiata nel contesto della riprogrammazione epigenetica, dell’espressione genica associata alla totipotenza e del mantenimento dell’integrità genomica sotto stress replicativo. La disregolazione di questi processi è rilevante per anomalie dello sviluppo e fenotipi di instabilità genomica che possono informare modelli di trasformazione oncogenica e disfunzione delle cellule staminali.
ZSCAN4C Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Zscan4c nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Zscan4c. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Zscan4c. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Zscan4c interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.