ZIP10 Plasmide Double Nickase (m): sc-432673-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZIP10 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZIP10 Double Nickase Plasmid (m) e il ZIP10 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Slc39a10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZIP10 Plasmide Double Nickase (m) | sc-432673-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZIP10 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-432673-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc39a10 codifica il trasportatore murino di influx dello zinco ZIP10 (famiglia SLC39), che regola la disponibilità di Zn²⁺ nel citosol e i conseguenti programmi enzimatici e trascrizionali dipendenti dallo zinco. Controllando l’ingresso dello zinco attraverso le membrane cellulari, ZIP10 influenza processi quali la trasduzione del segnale, le risposte allo stress ossidativo e la funzione delle cellule immunitarie, in cui lo zinco agisce da secondo messaggero e cofattore. Un’alterata omeostasi del trasporto dello zinco è stata associata a infiammazione deregolata e stress metabolico, e la gestione dello zinco dipendente da ZIP10 è spesso studiata nel contesto della biologia ematopoietica ed epiteliale. Di conseguenza, Slc39a10 è rilevante per indagini meccanicistiche delle vie regolata dallo zinco, inclusi il signaling citochinico, il controllo redox e i programmi di differenziazione cellulare.
ZIP10 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Slc39a10 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Slc39a10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Slc39a10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Slc39a10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.