ZIP10 Plasmide Double Nickase (h): sc-406811-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZIP10 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZIP10 Double Nickase Plasmid (h) e il ZIP10 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC39A10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ZIP10 Antibody (1F6): sc-517167
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZIP10 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406811-NIC | 20 µg | $410.00 |
SLC39A10 codifica ZIP10, un importatore di zinco della membrana plasmatica che contribuisce a regolare la disponibilità intracellulare di Zn²⁺, necessaria per la funzione delle metalloproteine, l’equilibrio redox e il controllo trascrizionale. Modellando la segnalazione dipendente dallo zinco e l’attività enzimatica, ZIP10 contribuisce a processi quali la differenziazione cellulare, la funzione delle cellule immunitarie e le risposte allo stress. Alterazioni del trasporto di zinco tramite i membri della famiglia ZIP sono state associate, in contesti rilevanti per la malattia, a proliferazione deregolata e a segnalazione infiammatoria alterata. Lo studio di ZIP10 supporta indagini meccanicistiche sulle vie dell’omeostasi dei metalli e sui loro effetti a valle sul metabolismo cellulare e sulle reti di segnalazione.
ZIP10 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC39A10 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC39A10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC39A10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC39A10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.