USP43 Plasmide Double Nickase (h): sc-416563-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- USP43 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il USP43 Double Nickase Plasmid (h) e il USP43 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira USP43. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: USP43 Antibody (C-8): sc-398436
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
USP43 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416563-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP43 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416563-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP43 umano codifica un enzima deubiquitinante del sistema ubiquitina–proteasoma che regola la stabilità proteica e la segnalazione rimuovendo l’ubiquitina dalle proteine bersaglio. In quanto proteasi specifica per l’ubiquitina, USP43 è collegata al controllo della proteostasi e può influenzare le risposte cellulari allo stress, la progressione del ciclo cellulare e l’integrità del genoma attraverso la modulazione del turnover dipendente dall’ubiquitina. Alterazioni della dinamica di deubiquitinazione sono spesso associate a risposte al danno al DNA deregolate e a fenotipi di proliferazione aberrante osservati in molteplici contesti patologici. Lo studio della funzione di USP43 aiuta a chiarire come gli enzimi deubiquitinanti plasmino le reti di segnalazione dell’ubiquitina e le vie trascrizionali e di riparazione a valle.
USP43 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus USP43 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di USP43. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di USP43. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con USP43 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.