USP2 Plasmide Double Nickase (m): sc-424700-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- USP2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il USP2 Double Nickase Plasmid (m) e il USP2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Usp2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
USP2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-424700-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-424700-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Usp2 codifica per la peptidasi 2 specifica per l’ubiquitina (USP2), un enzima deubiquitinante che inverte il turnover proteico dipendente dall’ubiquitina e modula la stabilità dei substrati in molteplici programmi cellulari. USP2 è stata collegata alla regolazione della progressione del ciclo cellulare, dell’apoptosi e della segnalazione in risposta allo stress, inclusa la comunicazione incrociata con vie infiammatorie e metaboliche che dipendono da un controllo fine dell’editing dell’ubiquitina. Modellando l’emivita delle proteine e l’ampiezza dei segnali, USP2 influenza gli output trascrizionali e l’omeostasi cellulare in modo dipendente dal contesto. Un’attività o un’espressione di USP2 deregolate sono state associate a fenotipi rilevanti per la malattia, come proliferazione alterata, squilibri nella segnalazione immunitaria e disfunzione metabolica, a supporto del suo impiego come nodo meccanicistico negli studi di via di segnalazione.
USP2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Usp2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Usp2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Usp2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Usp2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.