UBXD4 Plasmide Double Nickase (h): sc-414883-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- UBXD4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il UBXD4 Double Nickase Plasmid (h) e il UBXD4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira UBXN2A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
UBXD4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-414883-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UBXD4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-414883-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBXN2A codifica UBXD4, un cofattore contenente un dominio UBX che interagisce con l’ATPasi AAA+ p97/VCP per coordinare il controllo di qualità delle proteine dipendente dall’ubiquitina. UBXD4 è implicata nella degradazione associata al reticolo endoplasmatico (ERAD), nel turnover legato al proteasoma e nel mantenimento della proteostasi cellulare in condizioni di stress. Attraverso questi processi, UBXD4 può influenzare la stabilità di proteine regolatorie e la rimozione di specie proteiche ripiegate in modo errato o danneggiate. La disregolazione delle reti di adattatori di p97 e delle vie ubiquitina–proteasoma è ampiamente collegata a difetti di proteostasi associati a neurodegenerazione e cancro, rendendo UBXN2A un bersaglio rilevante per studi meccanicistici.
UBXD4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus UBXN2A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di UBXN2A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di UBXN2A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con UBXN2A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.