TSSC4 Plasmide Double Nickase (h): sc-410490-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TSSC4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TSSC4 Double Nickase Plasmid (h) e il TSSC4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TSSC4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TSSC4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410490-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TSSC4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410490-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TSSC4 (tumor suppressing subtransferable candidate 4) è un gene umano che codifica una proteina, originariamente mappato nella regione imprintata 11p15.5 e studiato nel contesto del controllo della crescita e della biologia tumorale. Sebbene la sua funzione molecolare rimanga definita solo in parte, TSSC4 è stato collegato a programmi cellulari che regolano proliferazione e sopravvivenza, e il suo contesto genomico viene spesso esaminato per i meccanismi di regolazione epigenetica e l’espressione allele-specifica. La disregolazione del locus 11p15.5 è associata a disturbi dello sviluppo legati alla crescita e a processi oncogenici, rendendo TSSC4 un bersaglio utile per studi meccanicistici delle vie associate all’imprinting. La perturbazione sperimentale di TSSC4 consente di indagare come la regolazione a livello di locus influenzi il comportamento del ciclo cellulare e le reti trascrizionali responsivo-allo-stress.
TSSC4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TSSC4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TSSC4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TSSC4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TSSC4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.