Plasmide Double Nickase (h) T2R14: sc-410582-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) T2R14 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide T2R14 Double Nickase (h) et le plasmide T2R14 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TAS2R14. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) T2R14 | sc-410582-NIC | 20 µg | $410.00 |
TAS2R14 code le récepteur humain du goût amer T2R14, un RCPG (GPCR) de classe A qui détecte divers composés amers et se couple à des protéines G hétérotrimériques pour réguler la signalisation des seconds messagers. L’activation du récepteur engage généralement des voies dépendantes de la PLCβ, qui augmentent le calcium intracellulaire et modulent les réseaux de signalisation MAPK ainsi que d’autres voies en aval, influençant la sécrétion, la motilité et les programmes de défense innée dans des tissus extra-oraux. L’expression de TAS2R14 a été rapportée au-delà du système gustatif, notamment dans les épithéliums des voies respiratoires et du tractus gastro-intestinal, où la signalisation chimiosensorielle peut façonner les réponses de barrière et les réponses inflammatoires. Des altérations de la signalisation des récepteurs de l’amer ont été étudiées dans le contexte de l’hyperréactivité bronchique, de maladies inflammatoires chroniques et de modifications de la signalisation associées aux tumeurs, ce qui étaye sa pertinence pour les études des mécanismes de la maladie.
T2R14 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TAS2R14 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TAS2R14. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TAS2R14. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TAS2R14.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.