STEAP2 Plasmide Double Nickase (m): sc-428702-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- STEAP2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il STEAP2 Double Nickase Plasmid (m) e il STEAP2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Steap2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
STEAP2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-428702-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
STEAP2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-428702-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Steap2 codifica l’antigene epiteliale prostatico a sei segmenti transmembrana 2 (STEAP2), una metalloreduttasi associata alla membrana implicata nell’omeostasi di ferro e rame attraverso la riduzione degli ioni ferrici e cuprici, facilitando l’ingresso dei metalli nelle cellule. Nelle cellule murine, STEAP2 si localizza in compartimenti endosomiali e della membrana plasmatica e contribuisce alla regolazione redox, al traffico vescicolare e a processi metabolici legati a enzimi dipendenti dai metalli. Alterazioni dell’attività della famiglia STEAP sono state associate a stress ossidativo, proliferazione disregolata e cambiamenti nei programmi di differenziamento in diversi contesti tissutali. Steap2 è quindi di interesse per lo studio delle vie di gestione degli ioni metallici e del loro impatto sulla segnalazione cellulare e su fenotipi associati a malattia, in vivo e in vitro.
STEAP2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Steap2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Steap2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Steap2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Steap2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.