
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SLC35A2CRISPR激活质粒(h) | sc-408155-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
SLC35A2CRISPR激活质粒(h2) | sc-408155-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
SLC35A2 编码一种定位于高尔基体的 UDP-半乳糖转运蛋白,可将胞质中的活化半乳糖转运进入高尔基体腔内,从而支持 N- 与 O-连接糖链及糖脂的半乳糖基化。通过调控核苷酸糖的可用性,SLC35A2 影响糖蛋白成熟、细胞表面受体功能、囊泡运输以及分泌通路稳态。SLC35A2 活性异常与蛋白糖基化缺陷相关,并可进一步影响细胞信号传导与组织发育;该基因也常在先天性糖基化障碍(CDG)及嵌合突变生物学研究中被重点关注。因此,SLC35A2 与依赖糖链的机制研究密切相关,这些机制可塑造细胞黏附、免疫识别以及膜蛋白稳定性。
SLC35A2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SLC35A2的表达。
SLC35A2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SLC35A2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SLC35A2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SLC35A2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SLC35A2位点,并能够研究内源性位点上依赖于SLC35A2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SLC35A2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SLC35A2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。