SLAMF6 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-409009-ACT

SLAMF6（signaling lymphocytic activation molecule family member 6、別名 NTB-A/CD352）は免疫グロブリンスーパーファミリーに属する受容体で、主としてT細胞、NK細胞、および一部のB細胞サブセットに発現しています。ホモフィリックに結合する共受容体として機能し、活性化の閾値やエフェクター機能プログラムを調節します。SLAM関連アダプターを介したシグナル伝達（SAP/SH2D1A依存性経路を含む）を通じて、SLAMF6は初期のチロシンリン酸化イベントや下流の転写出力に影響し、サイトカイン産生、細胞傷害活性、リンパ球間クロストークを形作ります。SLAMF6シグナルの変調は免疫恒常性の破綻や免疫介在性病態と関連づけられており、慢性炎症、感染、腫瘍免疫などの文脈で頻繁に検討されています。リンパ球機能を制御する表面チェックポイント様の調節因子として、SLAMF6は受容体共刺激、疲弊（exhaustion）関連状態、系譜特異的な免疫シグナル伝達ネットワークを研究するための機序的ハブとして広く用いられています。

SLAMF6 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性SLAMF6の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

SLAMF6 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における SLAMF6 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はSLAMF6転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性SLAMF6の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のSLAMF6遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるSLAMF6依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびSLAMF6発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるSLAMF6経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。