SG2NA Plasmide Double Nickase (h): sc-405152-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SG2NA Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SG2NA Double Nickase Plasmid (h) e il SG2NA Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira STRN3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SG2NA Antibody (S68): sc-13562
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SG2NA Plasmide Double Nickase (h) | sc-405152-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SG2NA Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405152-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STRN3 codifica la striatina-3 (SG2NA), un membro della famiglia delle striatine, proteine scaffold a ripetizioni WD che organizzano assemblaggi di segnalazione multiproteici. SG2NA partecipa a complessi correlati a STRIPAK e supporta la regolazione spaziale di fosfatasi e chinasi serina/treonina, collegando la segnalazione associata alla membrana al rimodellamento del citoscheletro e al traffico vescicolare. Attraverso queste interazioni, STRN3 può influenzare vie che controllano la polarità cellulare, la migrazione e la progressione del ciclo cellulare, e la sua deregolazione è stata studiata in contesti in cui un’architettura aberrante delle reti di segnalazione contribuisce a fenotipi tumorigeni. STRN3 è anche oggetto di studio per il suo ruolo nella modulazione della segnalazione in risposta allo stress e della dinamica dei complessi proteici tra diversi compartimenti subcellulari.
SG2NA Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus STRN3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di STRN3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di STRN3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con STRN3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.