SAP 18 Plasmide Double Nickase (h): sc-404214-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SAP 18 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SAP 18 Double Nickase Plasmid (h) e il SAP 18 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SAP18. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SAP 18 Antibody (C-3): sc-365377
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SAP 18 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404214-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SAP 18 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404214-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **SAP18** codifica **SAP 18**, un componente centrale del macchinario di repressione trascrizionale **Sin3A/HDAC**, che contribuisce ad accoppiare i fattori di legame al DNA specifici di sequenza alla deacetilazione degli istoni e alla compattazione della cromatina. Attraverso la sua partecipazione al silenziamento genico dipendente da HDAC, SAP 18 influenza programmi trascrizionali che regolano il controllo del ciclo cellulare, la differenziazione e le risposte allo stress cellulare. I complessi associati a SAP18 intersecano anche le vie di processamento dell’RNA e di segnalazione apoptotica, riflettendo ruoli ampi nel mantenimento dell’omeostasi nucleare. Un’alterata regolazione dei componenti di Sin3/HDAC, incluso SAP18, è stata collegata a stati epigenetici deregolati osservati nel cancro e in altri disturbi caratterizzati da un controllo trascrizionale aberrante.
SAP 18 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SAP18 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SAP18. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SAP18. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SAP18 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.