RGS7 Plasmide Double Nickase (m): sc-423946-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RGS7 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RGS7 Double Nickase Plasmid (m) e il RGS7 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Rgs7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RGS7 Plasmide Double Nickase (m) | sc-423946-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RGS7 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423946-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Rgs7 codifica il Regolatore della segnalazione delle proteine G 7 (RGS7), una proteina attivatrice della GTPasi arricchita nei neuroni che accelera l’attività di Gαi/o e di subunità correlate per terminare la segnalazione mediata dai GPCR. Modellando la cinetica e l’ampiezza delle vie attivate dai neurotrasmettitori, RGS7 modula gli output dei secondi messaggeri, inclusi cAMP/PKA e la regolazione a valle dei canali ionici, che influenzano l’eccitabilità neuronale e la trasmissione sinaptica. RGS7 agisce all’interno di complessi macromolecolari con Gβ5 e ancore di membrana come R7BP per controllarne la localizzazione e il bias di segnalazione nei circuiti neurali. Un’alterata tempistica della segnalazione GPCR mediata dalle proteine della famiglia RGS è rilevante per studi su fenotipi neurocomportamentali e meccanismi a livello di circuito implicati nella biologia delle malattie neurologiche e psichiatriche.
RGS7 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Rgs7 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Rgs7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Rgs7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Rgs7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.