RelB Particelle di Attivazione Lentivirale (h): sc-400371-LAC

RELB umano codifica RelB, un fattore di trascrizione della famiglia NF-κB che opera principalmente nella via non canonica di NF-κB attraverso l’eterodimerizzazione con p52 (NFKB2), regolando programmi di espressione genica specifici del contesto. L’attività di RelB integra segnali provenienti da recettori quali BAFFR, CD40 e il recettore della linfotossina-β, influenzando la differenziazione delle cellule immunitarie, l’organogenesi dei tessuti linfoidi, la maturazione delle cellule dendritiche e le risposte infiammatorie. I suoi output trascrizionali modulano reti di citochine e chemochine, la sopravvivenza cellulare e le vie di presentazione dell’antigene, collegando RELB alla disregolazione immunitaria e alla biologia delle patologie associate all’infiammazione. Alterazioni della segnalazione di RELB sono state inoltre studiate in programmi oncogeni e del microambiente, in cui il rimodellamento della via NF-κB contribuisce a fenotipi di proliferazione, risposta allo stress ed evasione immunitaria.

Le particelle di attivazione lentivirale RelB (h) rispondono a questa esigenza incapsulando il sistema completo di attivazione trascrizionale del mediatore di attivazione sinergica (SAM) in particelle lentivirali ad alto titolo pronte per la trasduzione, consentendo un'efficiente sovraregolazione di RELB in una gamma più ampia di tipi di cellule umane.

Le particelle di attivazione lentivirale RelB (h) veicolano tutti i componenti funzionali del sistema del mediatore di attivazione sinergica (SAM) tramite trasduzione lentivirale. Il sistema comprende tre preparati di particelle co-trasdotti nelle cellule bersaglio: uno che codifica per dCas9 cataliticamente inattivo (mutazioni D10A e N863A) fuso al dominio di transattivazione VP64 con un gene di resistenza alla blasticidina; una che codifica la proteina di fusione MS2-p65-HSF1 con un gene di resistenza all'igromicina; e una che codifica un sgRNA di 20 nt specifico per il bersaglio fuso a due aptameri di RNA MS2 con un gene di resistenza alla puromicina. A seguito della trasduzione lentivirale e dell'integrazione genomica dei cassetti di espressione, i componenti del SAM vengono espressi in modo stabile e si assemblano nel locus bersaglio all'interno della regione promotrice prossimale a monte del sito di inizio della trascrizione RELB, dove VP64, p65 e HSF1 agiscono in modo cooperativo per reclutare il machinery trascrizionale endogeno e guidare una sovraregolazione sostenuta dell'espressione endogena di RelB. L'uso di dCas9 inattivo nei confronti delle nucleasi evita l'introduzione di rotture del DNA a doppio filamento e preserva il locus genomico nativo RELB e l'architettura regolatoria.

Il formato lentivirale offre diversi vantaggi pratici: l'integrazione genomica stabile supporta l'attivazione ereditaria attraverso le divisioni cellulari; le preparazioni di particelle ad alto titolo eliminano la necessità di una produzione virale interna; e la compatibilità con tipi di cellule primarie, non in divisione e resistenti alla trasfezione amplia l'accessibilità sperimentale. Il successo della trasduzione può essere confermato e potenziato attraverso una selezione antibiotica tripla utilizzando puromicina, igromicina e blasticidina.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.