RelB Plasmide Double Nickase (h): sc-400371-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RelB Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RelB Double Nickase Plasmid (h) e il RelB Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RELB. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: RelB Antibody (D-4): sc-48366
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RelB Plasmide Double Nickase (h) | sc-400371-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RelB Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400371-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RELB codifica RelB, un fattore di trascrizione della famiglia NF-κB che agisce prevalentemente nella via non canonica di NF-κB attraverso l’eterodimerizzazione con p52 (NFKB2). RelB regola programmi genici coinvolti nella maturazione delle cellule dendritiche, nell’organogenesi linfoide, nella sopravvivenza delle cellule B e nella segnalazione infiammatoria, integrando segnali provenienti da recettori quali CD40, BAFFR e LTβR. Modellando l’espressione di citochine e chemochine, nonché le vie di presentazione dell’antigene, RelB influenza le risposte immunitarie innate e adattative. Un’attività deregolata di RELB è stata associata a disfunzioni immunitarie e a fenotipi infiammatori, e l’alterazione dell’equilibrio delle vie di NF-κB è frequentemente oggetto di studio nel contesto della segnalazione nel microambiente tumorale e della biologia delle neoplasie ematologiche.
RelB Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RELB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RELB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RELB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RELB interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.