Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RecQL1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402845-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RecQL1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RecQL1 Double Nickase Plasmid (h) e il RecQL1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RECQL. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: RecQL1 Antibody (A-9): sc-166388
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RecQL1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402845-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RecQL1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402845-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **RECQL** codifica **RecQL1**, un’elicasi del DNA 3′–5′ della famiglia RecQ che salvaguarda la stabilità del genoma durante la replicazione e la riparazione del DNA. RecQL1 partecipa al riavvio delle forcelle di replicazione, alla risoluzione delle forcelle bloccate o regredite e degli intermedi associati alla ricombinazione, collegandosi ai processi centrali della risposta al danno del DNA. Attraverso queste attività, contribuisce a un controllo accurato dello scambio tra cromatidi fratelli e al mantenimento dell’integrità cromosomica in condizioni di stress genotossico. Alterazioni della funzione di RECQL/RecQL1 sono state associate a un aumento dello stress replicativo e a fenotipi di instabilità genomica rilevanti per la biologia del cancro e per la ricerca sui difetti di riparazione del DNA.
RecQL1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RECQL nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RECQL. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RECQL. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RECQL interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.