OGG1 Plasmide Double Nickase (m): sc-422012-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- OGG1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il OGG1 Double Nickase Plasmid (m) e il OGG1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Ogg1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
OGG1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-422012-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
OGG1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-422012-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Ogg1 codifica OGG1, una DNA glicosilasi che avvia la riparazione per escissione di base (BER) riconoscendo ed escidendo le lesioni di 8-ossoguanina generate dalle specie reattive dell’ossigeno. Questa attività previene le trasversioni mutagene G:C→T:A e preserva la stabilità del genoma durante la replicazione e la trascrizione. OGG1 opera all’interno delle reti di risposta allo stress ossidativo e coordina l’azione con gli enzimi BER a valle per ripristinare l’integrità del DNA. Un’attività alterata di OGG1 è stata associata a un aumento del carico di danno ossidativo al DNA ed è spesso studiata in contesti quali infiammazione, stress metabolico, neurodegenerazione e modelli di cancerogenesi.
OGG1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Ogg1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Ogg1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Ogg1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Ogg1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.