ODCp Plasmide Double Nickase (h): sc-410634-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ODCp Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ODCp Double Nickase Plasmid (h) e il ODCp Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira AZIN2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ODCp Plasmide Double Nickase (h) | sc-410634-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ODCp Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410634-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AZIN2 umano codifica l’ornitina decarbossilasi paraloga (ODCp), un regolatore della via delle poliammine che modula i livelli cellulari di putrescina, spermidina e spermina interagendo con il controllo antizima-dipendente dell’attività e del turnover della decarbossilasi. Attraverso questa regolazione, AZIN2 contribuisce all’omeostasi delle poliammine, influenzando processi fondamentali come la traduzione, la progressione del ciclo cellulare, il traffico vescicolare e la differenziazione. Un metabolismo delle poliammine deregolato è spesso associato a proliferazione alterata e risposte allo stress, rendendo AZIN2/ODCp rilevante per lo studio della riprogrammazione metabolica e del controllo della crescita in diversi stati cellulari associati a malattia. L’espressione di AZIN2 è stata inoltre associata a fenotipi secretori specializzati in specifici tessuti, a supporto dell’indagine sulla regolazione della secrezione e della maturazione cellulare dipendente dalle poliammine.
ODCp Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus AZIN2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di AZIN2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di AZIN2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con AZIN2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.