NSUN2 Plasmide Double Nickase (h): sc-405097-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NSUN2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NSUN2 Double Nickase Plasmid (h) e il NSUN2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NSUN2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NSUN2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405097-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NSUN2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405097-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NSUN2 codifica una metiltransferasi dell’RNA citosina-5 che deposita modificazioni m5C su diversi substrati di RNA, inclusi tRNA e mRNA, influenzando la stabilità dell’RNA, l’efficienza di traduzione e le risposte allo stress. Regolando la metilazione dei tRNA e il processamento dell’RNA, NSUN2 contribuisce alla biogenesi dei ribosomi, alla progressione del ciclo cellulare e a programmi coordinati di proteostasi. Un’attività alterata di NSUN2 è stata associata a una perturbazione del panorama delle modificazioni dell’RNA e a conseguenti cambiamenti nell’espressione genica, collegandola a fenotipi caratterizzati da un controllo della crescita compromesso e da un’adattamento allo stress cellulare alterato. Queste caratteristiche rendono NSUN2 un utile punto di ingresso per studiare la regolazione epitranscrittomica e i meccanismi di controllo post-trascrizionale nelle cellule umane.
NSUN2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NSUN2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NSUN2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NSUN2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NSUN2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.