NALP6 Plasmide Double Nickase (m): sc-430389-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NALP6 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NALP6 Double Nickase Plasmid (m) e il NALP6 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Nlrp6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NALP6 Plasmide Double Nickase (m) | sc-430389-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NALP6 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-430389-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Nlrp6** codifica **NALP6**, un recettore citosolico di tipo NOD (NOD-like) che funziona come sensore dell’immunità innata e regolatore della segnalazione associata all’inflammasoma. NALP6 influenza l’attivazione della caspasi-1, la maturazione delle citochine della famiglia dell’IL-1 e i programmi trascrizionali infiammatori a valle, collegando il riconoscimento di microrganismi e segnali di pericolo alle risposte immunitarie epiteliali e mieloidi. Nel tratto gastrointestinale, NLRP6 è stato implicato nel mantenimento della funzione di barriera della mucosa e nel modulare le interazioni ospite–microbioma, con rilevanza per modelli di colite e infiammazione intestinale. Alterazioni dell’attività di NLRP6 sono state studiate anche nel contesto della suscettibilità alle infezioni e dell’omeostasi tissutale guidata dall’infiammazione.
NALP6 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Nlrp6 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Nlrp6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Nlrp6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Nlrp6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.