MOZ Plasmide Double Nickase (h): sc-403564-NIC

KAT6A (MOZ) codifica una istone acetiltransferasi della famiglia MYST che acetila principalmente l’istone H3 (inclusi H3K9 e H3K14) per favorire una cromatina aperta e l’attivazione trascrizionale. MOZ agisce all’interno di complessi multiproteici che regolano la cromatina e coordina l’attività di enhancer e promotori, influenzando la progressione del ciclo cellulare, le risposte al danno al DNA e programmi di espressione genica specifici di linea. In contesti ematopoietici e dello sviluppo, KAT6A contribuisce a mantenere gli stati trascrizionali necessari all’autorinnovamento e alla differenziazione delle cellule progenitrici. La disregolazione di KAT6A tramite mutazioni, variazioni del dosaggio o riarrangiamenti cromosomici è stata collegata a un controllo trascrizionale aberrante e a fenotipi oncogenici o neuroevolutivi, rendendolo un nodo utile per studi meccanicistici incentrati sull’epigenetica.

MOZ Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KAT6A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KAT6A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KAT6A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KAT6A interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.