Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
MeCP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-401228-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MeCP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MeCP2 Double Nickase Plasmid (h) e il MeCP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MECP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MeCP2 Antibody (G-6): sc-137070
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MeCP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401228-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MeCP2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401228-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MECP2 codifica la proteina 2 legante il metil-CpG (MeCP2), un regolatore associato alla cromatina che interpreta la metilazione del DNA e modula i programmi trascrizionali in modo dipendente dal contesto. MeCP2 si lega ai dinucleotidi CpG metilati e interagisce con complessi corepressori e di rimodellamento della cromatina, influenzando le modificazioni degli istoni, la compattazione della cromatina e l’espressione genica mediata dall’RNA polimerasi II. Attraverso questi meccanismi epigenetici, MeCP2 contribuisce alla maturazione neuronale, alla funzione sinaptica e alle risposte trascrizionali dipendenti dall’attività. La disregolazione di MECP2 è fortemente associata a disturbi del neurosviluppo ed è frequentemente studiata in modelli di controllo trascrizionale, biologia della cromatina e reti geniche neuronali.
MeCP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MECP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MECP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MECP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MECP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.