LHPP Plasmide Double Nickase (m): sc-429326-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LHPP Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LHPP Double Nickase Plasmid (m) e il LHPP Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Lhpp. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LHPP Antibody (B-2): sc-376648
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LHPP Plasmide Double Nickase (m) | sc-429326-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LHPP Plasmide Double Nickase (m2) | sc-429326-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Lhpp** codifica **LHPP**, una fosfatasi dell’istidina che idrolizza i residui di fosfoistidina e contribuisce alla regolazione dell’equilibrio della fosforilazione cellulare. Modulando la fosforilazione dell’istidina, LHPP può influenzare reti di segnalazione collegate all’omeostasi metabolica, alla dinamica del citoscheletro e al controllo del ciclo cellulare. Un’attività alterata di LHPP è stata associata in letteratura a una disregolazione dei segnali di crescita e a una riprogrammazione metabolica in contesti rilevanti per la malattia, a supporto del suo studio in modelli di biologia tumorale e fisiologia tissutale. Queste caratteristiche rendono **Lhpp** un bersaglio utile per analizzare vie dipendenti dalla fosforilazione e i relativi effetti a valle a livello trascrizionale e fenotipico.
LHPP Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Lhpp nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Lhpp. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Lhpp. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Lhpp interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.