LECT2 Plasmide Double Nickase (h): sc-407039-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LECT2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LECT2 Double Nickase Plasmid (h) e il LECT2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LECT2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LECT2 Antibody (B-6): sc-398071
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LECT2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407039-NIC | 20 µg | $410.00 |
LECT2 umano codifica la chemotaxina 2 derivata da cellule leucocitarie (leukocyte cell-derived chemotaxin 2), un’epatokina secreta e proteina immunomodulatrice implicata nella chemiotassi dei leucociti e nella regolazione della segnalazione infiammatoria. LECT2 è legata all’omeostasi metabolica e immunitaria epatica ed è stata associata a vie che influenzano le risposte citochiniche, il rimodellamento tissutale e le modifiche del microambiente extracellulare. Un’espressione alterata di LECT2 è stata riportata in diverse patologie epatiche e in stati infiammatori sistemici, e la proteina è studiata come modulatore dipendente dal contesto della biologia tumorale e dei processi legati alla fibrosi. Queste caratteristiche rendono LECT2 un bersaglio utile per analizzare il crosstalk tra fattori derivati dagli epatociti, il reclutamento di cellule dell’immunità innata e la regolazione del microambiente.
LECT2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LECT2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LECT2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LECT2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LECT2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.