KLRG2 Plasmide Double Nickase (h): sc-415620-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- KLRG2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il KLRG2 Double Nickase Plasmid (h) e il KLRG2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira KLRG2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: KLRG2 Antibody (B-12): sc-514346
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
KLRG2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-415620-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KLRG2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-415620-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KLRG2 codifica un membro della famiglia dei recettori lectin-like delle cellule killer, espresso su sottopopolazioni di linfociti citotossici, dove si ritiene moduli l’attivazione delle cellule immunitarie e le funzioni effettrici attraverso la segnalazione mediata dal recettore sulla superficie cellulare. Nell’ambito di circuiti regolatori più ampi di cellule NK e T, KLRG2 può influenzare la sorveglianza immunitaria, la risposta alle citochine e i programmi citotossici che plasmano l’infiammazione tissutale. Una segnalazione disregolata attraverso recettori inibitori/attivatori di questa famiglia è rilevante per i meccanismi di evasione immunitaria nel cancro e per l’attivazione immunitaria aberrante in contesti di infiammazione cronica. Lo studio di KLRG2 supporta l’indagine meccanicistica dei checkpoint guidati da recettori nella biologia delle cellule immunitarie umane e nelle interazioni tumore–sistema immunitario.
KLRG2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KLRG2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KLRG2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KLRG2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KLRG2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.