KIF13A Plasmide Double Nickase (h): sc-403751-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- KIF13A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il KIF13A Double Nickase Plasmid (h) e il KIF13A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira KIF13A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
KIF13A Plasmide Double Nickase (h) | sc-403751-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KIF13A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403751-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KIF13A codifica un motore dei microtubuli della famiglia kinesina-3 che alimenta il trasporto diretto verso l’estremità “plus” dei compartimenti di membrana, plasmando il traffico vescicolare, la dinamica endosomiale e la consegna polarizzata dei carichi in cellule in migrazione e in differenziamento. Accoppiando i microtubuli a vescicole associate a Rab e a regolatori della polarità, KIF13A contribuisce a processi quali il riciclo dei recettori, il rimodellamento di membrana e il coordinamento del citoscheletro. L’alterazione del traffico mediato da KIF13A può modificare l’output di segnalazione e il posizionamento degli organelli, con implicazioni per programmi cellulari come la funzione immunitaria, il trasporto neuronale e la biologia delle barriere. Studi genetici e funzionali hanno collegato KIF13A a vie associate a malattia che coinvolgono il trasporto intracellulare e la disregolazione epiteliale o immunitaria, motivando indagini meccanicistiche in modelli di cellule umane.
KIF13A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KIF13A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KIF13A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KIF13A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KIF13A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.