JNK2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400115-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- JNK2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il JNK2 Double Nickase Plasmid (h) e il JNK2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MAPK9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: JNK2 Antibody (A-7): sc-271133
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
JNK2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400115-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JNK2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400115-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAPK9 codifica la chinasi 2 N-terminale di c-Jun (JNK2), una MAP chinasi attivata dallo stress che fosforila fattori di trascrizione come c-JUN e ATF2 per coordinare la segnalazione infiammatoria, l’apoptosi e il controllo del ciclo cellulare. JNK2 agisce a valle delle MAP3K e delle MAP2K nella cascata JNK/MAPK, integrando segnali provenienti da citochine, stress ossidativo, stress del reticolo endoplasmatico e danno genotossico per regolare programmi trascrizionali dipendenti dal contesto. Attraverso la modulazione dell’attività di AP-1 e il cross-talk con le vie associate a NF-κB e p53, MAPK9 influenza le risposte immunitarie, la segnalazione neuronale e il rimodellamento tissutale. Un’alterata regolazione della segnalazione di JNK2 è stata implicata nell’adattamento allo stress associato al cancro, in processi neurodegenerativi e in fenotipi metabolici e infiammatori, rendendo MAPK9 un bersaglio comune negli studi meccanicistici delle vie di segnalazione.
JNK2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MAPK9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MAPK9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MAPK9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MAPK9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.